آپ بلک Ergothioneine کیسے نکالتے ہیں؟

گوانجی بائیوٹیک ایک ہے۔بلک ergothioneine پاؤڈرسپلائر. آئیے آج اس کے بارے میں بات کرتے ہیں۔ Ergothioneine (EGT) ایک قدرتی اینٹی آکسیڈینٹ ہے جسے انسانی جسم خود ترکیب نہیں کر سکتا۔ اس کے منفرد سیلولر فزیولوجیکل حفاظتی افعال ہیں جیسے کہ فری ریڈیکلز کی صفائی، سم ربائی، ڈی این اے بائیو سنتھیسز کی دیکھ بھال، خلیے کی معمول کی نشوونما، سیلولر امیونٹی، اینٹی ریڈی ایشن، سفیدی اور اینٹی ایجنگ۔بلک ergothioneine پاؤڈر(EGT) خوراک، کاسمیٹکس، فنکشنل فوڈ اور بایومیڈیکل انڈسٹریز میں اس کے استعمال کا وسیع امکان ہے۔ لیکن ایک ہی وقت میں، ایک قدرتی اینٹی آکسائڈنٹ کے طور پر، یہ محفوظ اور غیر زہریلا ہے، جو اسے موجودہ صنعت کی ترقی میں ایک گرم جگہ بناتا ہے.

Ergothioneine پاؤڈر کی تیاری کے طریقے

کی تیاری کے طریقےبلک ergothioneine پاؤڈرقدرتی حیاتیاتی اخراج، کیمیائی ترکیب اور حیاتیاتی ترکیب [3-4] شامل ہیں۔ کیمیائی ترکیب کا طریقہ تیار کرنا مشکل اور مہنگا ہے، اور حفاظت کی ضمانت نہیں دی جا سکتی۔ قدرتی بایو ایکسٹرکشن کے طریقہ کار میں کم پیداوار اور زیادہ لاگت ہوتی ہے۔ یہ ergothioneine کے استعمال کو محدود کرتا ہے۔ اس کے بائیو سنتھیس کے طریقہ کار میں کم لاگت اور خام مال کی آسان دستیابی کے فوائد ہیں۔

● ergothioneine کا کرسٹلائزیشن اور کیمیائی فارمولا

مصنوعی حیاتیات کے عروج کے ساتھ، ergothioneine کی پیداوار کو ابال کے ذرائع جیسے میٹابولک ماڈیولیشن کے ذریعے مؤثر طریقے سے بڑھایا جا سکتا ہے۔ یہ مصنوعات کی حفاظت کو یقینی بناتا ہے اور درخواست کی جگہ کو وسیع کرتا ہے۔بلک ergothioneine پاؤڈر. لہذا، انجنیئرڈ بیکٹیریا کی تعمیر کے لیے ابال اور تبدیلی کے لیے قدرتی خوردنی مائیکورریزل فنگس کا استعمال ergothioneine کی تیاری کے لیے مستقبل کی ترقی کی سمت بن گیا ہے۔

● ergothioneine کی پیداوار پر مصنوعی حیاتیات کے اثرات

کے لئے قدرتی mycorrhizal فنگی کی ابال ٹیکنالوجی کی بہتریبلک ergothioneine پاؤڈرپیداوار

قدرتی مائیکورریزل فنگس کی ایک قسم ergothioneine کی ترکیب کے قابل پائی گئی ہے۔ ان میں اینوکی مشروم، شیٹاکے مشروم، شیٹاکے مشروم، ریشی مشروم، پورسینی مشروم، ایگریکس بیسپورس مشروم، امیگڈالس مشروم، اور گولڈن ٹاپڈ سائیڈ آرم مشروم شامل ہیں۔

ترکیب سازی کے عمل کے مطالعہ میںبلک ergothioneine پاؤڈرmyxomycetes کے ابال کے ذریعے، یہ پایا گیا کہ مختلف قسم کے اور مختلف امائنو ایسڈز کے اثرات ergothioneine کی ترکیب اور جمع پر بہت مختلف ہیں۔ ان میں، میتھیونین کا ergothioneine کے جمع ہونے پر سب سے واضح فروغ اثر تھا۔ اس کے بعد سسٹین اور ہسٹیڈائن۔ ergothioneine کی پیداوار کے ابال کے عمل کی چھان بین کی گئی تھی شیٹاکے مشروم مائیسیلیم کو بطور مرکزی جسم استعمال کرتے ہوئے۔

جب کاربن کا ماخذ 25 g/L fructose اور 1 g/L aspartic acid تھا، تو پیداوار 1.89 mg/g DW تک پہنچ گئی۔ جب 2 mmol/L methionine کو درمیانے درجے میں شامل کیا گیا تو، مائسیلیم میں ergothioneine کی پیداوار 15 دن کے ابال کے بعد 1.8 گنا زیادہ تھی۔ بادام مشروم مائیسیلیم کو 10 L ٹینک پیمانے میں ابال کر کے ergothioneine کی پیداوار کے عمل کا مطالعہ کرنے کے لیے، 4 mmol/L histidine، 1 mmol/L cysteine ​​اور 1 mmol/L methionine کو کلچر میڈیم میں شامل کیا گیا۔

کا موادبلک ergothioneine پاؤڈرمائسیلیم میں ابال کے 18 ویں-20 دن تقریباً 64.2 ملی گرام فی لیٹر تھا۔ ergothioneine کے ابال کے لیے زیادہ سے زیادہ کاربن اور نائٹروجن ذرائع گلوکوز اور ٹرپٹون تھے، جنہیں درمیانے درجے کی اصلاح کے ذریعے مزید بہتر بنایا گیا۔ ergothioneine گولڈن ٹاپ سائڈروفور مائیسیلیم کا استعمال کرتے ہوئے گہرے ابال کے ذریعے تیار کیا گیا تھا۔ ایک ہی وقت میں، 8 mmol/L cysteine، 4 mmol/L histidine اور 0.5 mmol/L methionine شامل کیے گئے، اور mycelium میں ergothioneine کا مواد ابال کے 16 d پر 97.69 mg/L تک پہنچ گیا۔

ergothioneine کی ترکیب اور جمع ہونے پر امینو ایسڈز، پیش رو اور خارجی غذائیت کے عوامل کے اثرات کی بنیاد پر، اعلی ergothioneine کی پیداوار کے ساتھ ایک فلیٹ مشروم کے تناؤ کی جانچ کی گئی۔ اور ergothioneine کے اعلی شدت کے جمع کرنے کے لئے ایک گہری ابال کنٹرول کی حکمت عملی قائم کی گئی تھی۔ اس کے علاوہ، چونکہ مائکروجنزموں کے ذریعہ ترکیب کردہ زیادہ تر ergothioneine انٹرا سیلولر طور پر جمع ہوتا ہے، اس لیے اسے صرف خلیے میں منتقل کرکے ہی اس کا پتہ لگایا اور استعمال کیا جاسکتا ہے۔ کئی شعبوں میں پروڈکشن سیفٹی اور پروڈکٹ سیفٹی کی ضروریات کو پورا کرنے کے لیے، انٹرا سیلولر ergothioneine کے لیے ایک کل ایکویئس فیز لیچنگ کا عمل بھی قائم کیا گیا ہے [5]۔

بلک ergothioneine پاؤڈرقدرتی خوردنی مائیکورریزل فنگس کے ابال کے ذریعہ تیار کیا گیا تھا جو جینیاتی طور پر انجینئر نہیں کیا گیا تھا۔ سب سے بڑا فائدہ تناؤ اور مصنوعات کی خوراک کی حفاظت ہے۔ جینومکس اور ٹرانسکرپٹومکس کے مقابلے میں، مائکوبیکٹیریل میٹابولومکس کا نسبتاً کم مطالعہ کیا گیا ہے۔ لہذا، ابال کے عمل کے میٹابولومکس کا تجزیہ اور اصلاح کرنے سے ergothioneine کے ابال کے جمع ہونے کی سطح میں مزید بہتری آئے گی اور پیداواری لاگت میں کمی آئے گی۔

● مصنوعی حیاتیات کے ذریعہ ترمیم شدہ مائکروجنزموں کے ذریعہ ergothioneine کی تیاری

ergothioneine biosynthetic pathway اور key enzyme analysis کی نظریاتی رہنمائی کی بنیاد پر، ergothioneine biosynthetic enzymes کے heterologous اظہار کو کچھ ماڈل مائکروجنزموں میں محسوس کیا گیا۔ اس نے ergothioneine-انجینئرڈ بیکٹیریا کی ایک سیریز تیار کی، اور ابال کی پیداوار کو بڑھانے کے لیے بہتر بنایا گیا۔بلک ergothioneine پاؤڈربذریعہ 120- گنا۔

کلیدی انزائم کے لیے جین کو ای کولی میں کلون کیا گیا اور انجنیئرڈ بیکٹیریا کو فرمینٹر میں بیچ ریپلیشمنٹ کلچر پر لگایا گیا۔ ابال کے درمیانے درجے کو بہتر بنانے سے، ergothioneine کی پیداوار 216 h ابال کے بعد 657 mg/L تک پہنچ گئی، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ کلیدی انزائم اور اس سے متعلقہ ضابطے ergothioneine کی موثر ترکیب کو متاثر کر سکتے ہیں۔

کلیدی خامروں کے ضابطے کے علاوہ، پیشگی امینوسین کی ترکیب کے راستے میں ترمیم اور اصلاح بھی ergothioneine کی ترکیب کی کارکردگی کو بہتر بنانے کا ایک مؤثر طریقہ ہے۔ ergothioneine کی ترکیب کے راستے کے دو مختلف ذرائع Escherichia coli میں متضاد طور پر ظاہر کیے گئے تھے، جو ergothioneine کی پیداوار کو بہتر بنا سکتے ہیں۔ اس ترمیمی حکمت عملی کے ذریعے، ergothioneine کا جمع 108 گھنٹے کے لیے 710.53 mg/L تک پہنچ گیا جس میں 3L ٹینک کو دوبارہ بھرنے والے بیچ کے ابال کے لیے استعمال کیا گیا۔

متبادل طور پر، E. coli میں cysteine ​​synthesis اور secretion system کو چالو کر کے ایک اعلی سیسٹین پیدا کرنے والا تناؤ حاصل کیا گیا۔ ترکیب کلیدی اینزائم جین کو اس تناؤ میں کلون کیا گیا اور میتھیونین کی ترکیب کو متاثر کرنے والے جین کو ناک آؤٹ کر دیا گیا۔ ہسٹائڈائن، میتھیونین، اور Na2S2O3 جیسے سپلیمنٹس کے ساتھ 3 L fermenter میں خمیر کرنے کے لیے تبدیل شدہ سٹرین کا استعمال، اس کی پیداواربلک ergothioneine پاؤڈر216 گھنٹے کے لیے 1.3 g/L تک پہنچ گیا۔ یہ انجینئرڈ فنگل فرمینٹیشن کے ذریعہ ergothioneine کی تیاری کی اعلی ترین ابال کی سطح ہے جسے عوامی طور پر رپورٹ کیا گیا ہے۔

● مصنوعی حیاتیات میں ترمیم شدہ فنگس کے ذریعہ ergothioneine کی تیاری

فنگل ergothioneine کی ترکیب میں دو اہم انزائمز شامل ہیں۔ یہ مصنوعی راستے کے میٹابولک ریگولیشن کو بہت آسان بنا سکتا ہے۔ مستقبل میں، یہ ergothioneine کی heterologous ترکیب کا بنیادی مرکز بن سکتا ہے۔ پلسیٹیلا ولگارس کے ergothioneine ترکیب کا جین متضاد طور پر Aspergillus oryzae میں ظاہر کیا گیا تھا۔ Ergothioneine اس انجنیئرڈ بیکٹیریم کا استعمال کرتے ہوئے ٹھوس ریاست کے ابال کے ذریعے تیار کیا گیا تھا، اور اس کی پیداواربلک ergothioneine پاؤڈرابال کے بعد اصلاح 231 ملی گرام/کلوگرام تھی۔ 20-پچھلی ابال کے مقابلے میں ergothioneine کی ترکیب کی سطح میں گنا اضافہ حاصل کیا گیا تھا۔

قدرتی مائکوبیکٹیریا کے ذریعہ تیار کردہ ergothioneine کی سب سے زیادہ ابال کی سطح 500 mg/L سے زیادہ تھی۔ ابال کا دورانیہ عام طور پر 10-20 دن تھا۔ انجینئرڈ بیکٹیریم کے ابال کی مدت کو 3-9 d تک کنٹرول کیا جا سکتا ہے۔ سب سے زیادہ ابال کی سطح 1.3 g/L تھی۔ تاہم، مصنوعات کو صاف اور استعمال کرنے کی ضرورت ہے.

مستقبل میں، ہم ergothioneine کی ترکیب کے خصوصیت کے عناصر کو مزید دریافت اور بہتر بنائیں گے، اور اعلی ergothioneine کی پیداوار کے لیے تناؤ کے جینیاتی طریقہ کار کا تجزیہ کریں گے۔

ایک طرف، ہم ابال کے عمل کی اصلاح کے لیے نظریاتی رہنمائی فراہم کریں گے۔بلک ergothioneine پاؤڈر. دوسری طرف، ہم چیسس سیلز کے ساتھ ergothioneine کی ترکیب کے اجزاء کی مطابقت کو بہتر بنانے کے لیے مصنوعی حیاتیات کی ٹیکنالوجی کی مدد سے چیسس سیلز کو بہتر بنائیں گے۔ میٹابولک نیٹ ورک ماڈل کے ساتھ مل کر، ہم کلیدی خامروں کے اظہار کو بہتر بنا سکتے ہیں اور زیادہ مؤثر طریقے سے ergothioneine کی ترکیب کے لیے سیل فیکٹری بنا سکتے ہیں۔

گوانجی بائیوٹیک تیار کرتا ہے۔بلک ergothioneine پاؤڈر، جو سفید پاؤڈر ہے. ہماری مصنوعات HPLC طریقہ استعمال کرتی ہیں۔ ہم اپنی لیب کے ذریعے ٹیسٹ کر سکتے ہیں یا ہم تھرڈ پارٹی ٹیسٹ فراہم کر سکتے ہیں۔ ہم سے انکوائری میں خوش آمدید:info@gybiotech.com.

Rحوالہ

[1]، 麦角硫因机体内的分布与代谢和其在疾病中的作用研究进展. 食品科学, 2019, 40(23): 334-340.DOI:10.7506/spkx1002-6630-20181016-158

[2]،Borodina I، Kenny LC، McCarthy CM، et al. ergothioneine کی حیاتیات، ایک اینٹی آکسیڈینٹ نیوٹراسیوٹیکل۔ Nutr Res Rev, 2020, 33(2): 190-217۔ DOI:10.1017/S0954422419000301

[3]، سو جے زیڈ، یادن جے سی۔ l-(+)-ergothioneine کی ترکیب۔ J Org Chem، 1995، 60(20): 6296-6301۔ DOI:10.1021/jo00125a014

[4],麦角硫因的合成与降解代谢. 日然产物研究与开发, 2015, 27(6): 1112-1117, 1002.

[5]، Zhang W، Liu Q، Zhou T، et al. Pleurotus ostreatus کے mycelia سے ergothioneine کا پانی نکالنا اور ڈوبے ہوئے ابال کے دوران ergothioneine کے جمع ہونے کی باقاعدگی۔ تحقیق اور جائزے: جرنل آف مائیکرو بایولوجی اینڈ بائیو ٹیکنالوجی، 2016، 5(1): 1-8۔